Estudios básicos y aplicados sobre los genes pif de Baculoviridae

Fil: Turco, Cecilia Soledad. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Ingeniería Genética, Biología Celular y Molecular. Área Virosis de Insectos; Argentina. La actividad agrícola es una de las principales actividades económicas de nuestro país. Por ello, la preservación de los cultivos resulta de gran interés, siendo la sanidad vegetal uno de los objetivos más importantes. Dada la tendencia al monocultivo de soja en grandes extensiones de tierra, se generó un ambiente propicio para la expansión de plagas. Entre las más importantes en nuestro país, se encuentran las especies fitófagas, y, en particular en la región, la oruga de las leguminosas Anticarsia gemmatalis. Esta especie pertenece a la familia Noctuidae, dentro del orden Lepidoptera y constituye el defoliador de soja más importante del hemisferio occidental. Por ende, desarrollar nuevas tecnologías para el control de esta plaga resulta de gran importancia. Dentro de los mecanismos de control, y como una alternativa al uso excesivo de plaguicidas químicos, se destaca el baculovirus que infecta específicamente a dicho organismo, AgMNPV. Este virus pertenece a la familia Baculoviridae, familia de entomopatógenos que infecta artrópodos y, en particular, insectos de los órdenes Lepidoptera, Hymenoptera y Diptera. Una de las características de estos virus es la especificidad por sus hospedadores, determinada por un grupo de genes virales que determinan el rango de infección, a través de un mecanismo de interacción patógeno-hospedador que ocurre en el intestino medio de las larvas, una vez que ocurrió la ingesta de las partículas virales. Este grupo de genes se denominan pifs, y la ausencia de al menos uno de ellos en la molécula de DNA viral impide la infección por vía oral. Es por ello, que el estudio exhaustivo de estos genes podría significar mejoras en el agente de control, a través de modificaciones genéticas a realizarse en el DNA viral. Por lo antes expuesto, este trabajo de tesis se enfoca en el estudio de los genes pif, dentro de la familia Baculoviridae, y en especial del virus AgMNPV. La tesis se encuentra dividida en 8 capítulos, el primero de ellos comprende la Introducción de los temas tratados, como también las Hipótesis y Objetivos del trabajo. Luego se desarrollan los capítulos II-VI de Resultados y Discusiones, que comprenden los estudios filogenéticos basados en los genes pif, como su localización genómica (Capítulo II); el desarrollo de una metodología clasificatoria en base a la secuencia aminoacídica parcial de estos genes, su validación y aplicación de casos (Capítulo III); determinación de la cinética transcripcional de los genes pif y análisis de probables regiones promotoras (Capítulo IV); estudios estructurales de las proteínas PIF y, en particular, de PIF-0, además de la evaluación de un posible mecanismo de control viral contra varios lepidópteros en base al baculovirus AcMNPV (Capítulo V); y desarrollo de una plataforma para la generación de virus AgMNPV con limitación de propagación natural y una línea celular transgénica empaquetadora (Capítulo VI). Finalmente, el capítulo VII de Conclusiones y Perspectivas, en el cual se debaten los resultados obtenidos y se postulan nuevas formas de continuar el trabajo.